Esco2调控小鼠卵母细胞染色体黏合的分子机制开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

对于生命体而言，细胞分裂和细胞周期的调控中，姐妹染色单体的聚合是一个非常重要的过程，而 cohesin复合体在其中扮演着关键的角色。

cohesin是凝聚姐妹染色单体的介导元件，当其从复制叉中出现时，可以瞬间建立与姐妹染色单体间的生理联系[1]。

在减数分裂中的错误导致非整倍性是主要的已知流产和大部分遗传性生长缺陷的原因。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：1.1探索esco2在小鼠卵母细胞中的定位；1.2探索esco2对小鼠卵母细胞减数分裂中细胞周期的调控；1.3探索esco2在小鼠卵母减数分裂中对纺锤体组装和染色体分离的影响。

研究内容: 通过共定位实验，探究esco2在小鼠卵母细胞中的定位；通过染色体铺片实验，探究esco2对小鼠卵母细胞减数分裂中对细胞周期的调控；通过纺锤体和动粒的免疫荧光染色实验，探究esco2在小鼠卵母细胞2在小鼠卵母减数分裂中对纺锤体组装和染色体分离的影响；通过western blot检测esco2的蛋白含量，以证明通过sirna干扰可敲低esco2基因。

拟解决的关键问题：esco2调控小鼠卵母细胞染色体黏合的分子机制。

3. 研究的方法与方案

研究方法：3.1 小鼠卵母细胞的采集和体外培养实验动物的饲养严格按照南京农业大学动物研究委员会规定的指导方针执行。

本研究的实验动物为 4-6周龄的性成熟雌性icr小鼠。

雌鼠通过断颈致死，用剪刀和镊子打开腹腔取出两侧卵巢，放入提前在co2培养箱平衡的m2体外操作液滴中。

4. 研究创新点

在人中esco2的突变会引起罗伯茨综合症，主要是染色单体在着丝粒和染色体周围凝聚的缺陷。

此外，esco2已经被认定为一个减数分裂调节因子的候选者，拥有与stra8相似的转录表达谱。

尽管许多有关esco2的最新研究进展，它在卵母细胞中准确的作用仍然尚不明确。

5. 研究计划与进展

2016.09-2016.10查阅文献资料，熟悉实验操作，确定实验方案，购买试剂药品2016.10-2017.1 完成共定位，纺锤体和动粒的免疫荧光染色和WB测定实验2017.3-2017.4完成排极体的实验，并统计排极体率2017.4-2017.5 数据的汇总、整理，并查阅文献，解释相关实验现象，并作分析2017.5-2017.6毕业论文的撰写与结题答辩