环境内分泌干扰物双酚A对卵母细胞细胞器分布和功能的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题的意义：

家畜繁殖力与畜牧行业的发展息息相关，而保证卵子质量对于提高家畜繁殖力具有重大意义。卵母细胞的成熟是一个不连续的过程，期间经历两次漫长的停滞期，因此卵母细胞的质量极易受到外界的影响。环境中的有害物质是造成卵子质量下降的重要外界因素之一，过度的暴露在环境污染物下，会对各个发育时期的卵母细胞造成损伤，进而导致生殖障碍。

双酚a（bpa）具有雌激素类似物的作用，是一种常见的环境内分泌干扰物(eeds)，在粘合剂、表面涂料等物质中都可以检测到其存在^[1]，在畜牧生产过程中极易被养殖动物所接触。这对于哺乳动物生殖系统，尤其是卵母细胞，都存在一定的不良影响。此外，bpa可以干扰卵母细胞的发育成熟，并削弱其受精能力，甚至会阻碍后续胚胎发育，极大地降低卵母细胞的质量^[2]；而对于这些损伤的初步挽救方案也已有一些相关报道^[3]。然而bpa对于卵母细胞中细胞器的影响还尚未阐明，因此本课题将通过体外培养bpa暴露的小鼠卵母细胞，观察研究bpa对卵母细胞细胞器造成的损伤，进而从细胞器角度阐述bpa对小鼠卵母细胞质量的影响。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标

本课题将从bpa存在的生殖毒性方面入手，针对bpa对卵母细胞细胞器造成的损伤进行观察研究，从细胞器角度阐述bpa对小鼠卵母细胞质量的影响。

2.研究内容

3. 研究的方法与方案

1.研究方法

本实验以颈椎脱臼法处死小鼠获取gv期卵母细胞，经毒素处理体外成熟培养后，利用免疫荧光染色、western blot等技术，检测bpa处理对卵母细胞成熟及卵子细胞器的毒性作用。

2.技术路线

4. 研究创新点

家畜的繁殖一直以来都是畜牧学科的重要研究方向，其中母畜的卵子质量对于家畜繁育具有重要意义。BPA是一种常见的环境污染物，目前已知BPA会影响哺乳动物卵子质量，然而这种危害是否存在于细胞器方面，仍然需要更多实验数据加以证实。

5. 研究计划与进展

研究计划：

1、前期准备（2019年9月-10月）：查阅文献，梳理实验流程，完善实验计划。

2、预实验（2019年10月-11月）：进行相关实验技术培训，确认bpa工作浓度，并进行排极体率的测定；