南京一猪场仔猪肠道大肠杆菌噬菌体的分离鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

断奶仔猪腹泻是最常见、最严重的仔猪疾病之一，也是引起断奶仔猪死亡的重要原因，给我国养猪业带来了巨大损失。

致病性大肠杆菌，尤其是肠毒素大肠杆菌（etec）是引起断奶仔猪腹泻的主要病原之一[1]。

etec通过其表面特异性宿主菌毛黏附素与宿主肠黏膜受体发生特异性的黏附作用，使etec定植于小肠绒毛并在肠道中大量繁殖，释放肠毒素如不耐热（lt）和耐热肠毒素（st），使肠细胞功能紊乱,电解质和水失衡,大量流入肠腔，导致肠腔积液，超过肠道的吸收能力而出现腹泻[2]。

2. 研究的基本内容和问题

2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题 2.1研究目标：本课题拟分离仔猪断奶前与断奶后仔猪肠道中的大肠杆菌噬菌体，鉴定其种类，测定其裂解谱，探索仔猪肠道大肠杆菌噬菌体的存在情况和分布规律。

2.2研究内容：（1）采集江苏一猪场断奶前和断奶后仔猪的粪样。

（2）分离粪样中的大肠杆菌噬菌体。

3. 研究的方法与方案

3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 3.1 拟采取的研究方案 本试验选取仔猪作为实验对象，对断奶前后两种状况的仔猪均采取研究。

断奶前后的仔猪需保证健康状况良好，相似。

（1）采集猪场断奶前和断奶后仔猪的粪样 南京某猪场，取断奶前断奶后仔猪各5窝，每窝取3头健康状况良好且相同的仔猪取其粪样，并混作一份为样品。

4. 研究创新点

4.特色或创新之处 目前，对噬菌体研究的项目较少，并且对猪肠道噬菌体的研究多利用宏基因组学手段进行测序，了解肠道内所有噬菌体的存在情况，并未有报道具体研究大肠杆菌噬菌体在肠道内的分布、种类、随日龄变化的情况等。

而大肠杆菌与仔猪腹泻有密切关系，仔猪肠道内大肠杆菌噬菌体对大肠杆菌的影响是否影响仔猪腹泻值得进一步研究。

本项目研究仔猪大肠杆菌噬菌体的存在情况和分布规律，在思路上创新。

5. 研究计划与进展

5.项目研究计划及预期进展 1）2016年9月初到9月下旬 查阅相关文献，确立研究方向及内容。

预期:通过查阅文献，和老师的指导，顺利确定课题。

2）2016年10月到2017年4月 江苏某猪场进行采样，样品带回实验室进行相关实验操作。