Juno在哺乳动物卵子受精后的动态变化研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1. 研究背景及意义

有性繁殖是经过两性生殖细胞(例如精子和卵细胞)的结合，成为受精卵，再由受精卵发育成为新的个体的生殖方式。其几乎确保了所有真核生物生命繁衍的方式^[1]。一般情况下，一个卵内只进入一个精子，而保持单精状态，但有时则有两个以上的精子进入一个卵内，此现象称为多精受精。多精受精是导致家畜繁殖力低下，制约畜牧业发展的重要原因之一。哺乳动物中，猪多精受精的发生率很高，特别是体外受精过程中。

随着体外受精技术的成熟与发展，在生物学分子层面上，人们对精卵结合及受精过程中精子、卵子表面的受体蛋白有了一定的了解与认识，但其具体的调节机制目前仍不清楚。特别是位于卵子上的膜蛋白——juno，作为izumo1的受体蛋白，研究其在受精前后的动态变化规律，深入理解和认识猪多精受精的发生机理，对提高母猪的繁殖性能具有重要的理论意义和生产实践价值。

2. 研究的基本内容和问题

1. 研究目的

1.1 观察juno在猪和小鼠卵子受精后的动态变化。

1.2 分析比较juno在小鼠和猪卵子受精后动态变化的异同及原因。

3. 研究的方法与方案

1. 研究方法

本课题以小鼠和猪的卵母细胞为研究材料，采用免疫荧光染色技术对juno进行染色，观察卵母细胞体外成熟和体外受精过程中，juno在小鼠和猪卵子上的受精后的动态变化，分析比较两者的异同，为解析猪多精受精的发生提供理论依据。

4. 研究创新点

1. 目前国内外已有研究表明juno是位于小鼠卵子上的izumo1的膜蛋白受体，但关于juno在猪卵子上的定位还未有报道，特别是受精后该蛋白的动态变化。本课题用免疫荧光染色技术明确juno在猪卵子体外成熟、体外受精及受精后的动态变化，与小鼠作比较，使实验结果更具有说服力。

2.分析比较juno在猪和小鼠卵子受精后的动态变化，为解析猪多精受精的发生提供理论依据，具有研究视角的新型性。

5. 研究计划与进展

1.研究计划

课题申请人自2017年12月进行实验室学习卵母细胞等相关实验操作技术，2019年3月与在指导老师的指导下确定了研究课题，根据研究内容查阅了大量与课题有关的国内外资料和文献，了解了juno和izumo1蛋白、卵母细胞体外成熟等相关理论基础和研究现状。通过在实验室学习，已掌握卵母细胞体外培养、免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜等实验操作技术，对本课题的研究思路具有较明确的认知。申请人将在指导老师的指导下认真进行进一步实验研究，使实验结果更加完整。