PEDV s蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

PED在我国流行非常普遍，猪群感染率也非常高，给我国养猪业造成了重大的经济损失。因此需要一种可以有效控制PED流行的疫苗。虽然在我国已经有PED的灭活苗、弱毒苗等一些传统疫苗，但是这还不能够对PED进行有效的预防，灭活苗有需要浓缩应用抗原或大剂量接种、免疫时间短、需强化接种、不能引起局部免疫、细胞免疫弱、产生免疫力需要时间长、不利于紧急预防接种、疫苗费用高、只能注射免疫仔猪无法获得SIg A，免疫效果差等缺点；弱毒苗有成本高、易反祖、会散毒、存在潜在感染等危险；强毒苗主要用来给妊娠前的母猪进行免疫，但是有导致母猪流产的危险，还会不断在环境中散毒，很难在实践中推广应用。因此，传统疫苗不能被用来很好的预防 PED，急需另外一种既安全又有效的方法来预防PED。随着分子生物学等相关技术的不断发展，PED基因工程苗越来越受到人们的重视。

虽然国内外研究者对于猪流行性腹泻病疫苗的研究方面做了大量的工作，但是到目前为止还没有研究出可以控制猪流行性腹泻病的发生的特别有效的疫苗。

2. 研究的基本内容和问题

原核表达PEDV的s蛋白的一个片段，为亚单位疫苗的研究进行铺垫。

3. 研究的方法与方案

1.结合已有文献查找pedv中和表位，并选取

2.构建原核表达中和表位的载体pet-28a质粒，纯化蛋白，制备兔多抗，western blot检测多克隆抗体特异性

4. 研究创新点

s蛋白中的一个新的片段，进行原核表达，纯化蛋白，证实了该蛋白有较好的免疫原性

5. 研究计划与进展

2018.9-2018.10 通过已有文献，查找并选取pedv的中和表位

2018.10-2018.12构建原核表达中和表位的载体，纯化蛋白，制备兔多抗