1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
摘要：由于化石燃料资源正处于枯竭的趋势，石化化工产业向生物基和碳中和过程的转变已成为必然。
丁二酸又名琥珀酸，是非常重要的大宗化学品，被确认为未来潜在可替代能源化学物质之一。
目前，丁二酸通常是从石油中提炼出来的，但是在许多微生物的代谢途径中，丁二酸是一种天然的中间体。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
琥珀酸脱氢酶（sdh）复合体由五个亚基组成，其中sdh1和sdh2亚基形成了催化二聚体，由线粒体膜上的sdh3和sdh4亚基固定。
sdh复合体中高度保守的线粒体蛋白sdh5是sdh活性和稳定性所必需的第五亚基。
通过 crspr-cas9基因编辑技术，对琥珀酸下游路径中的关键酶琥珀酸脱氢酶sdh5进行基因敲除，中断tca循环，使得琥珀酸能够大量积累，提高琥珀酸产量，并通过优化发酵条件，提高琥珀酸的产量。
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