右旋糖酐蔗糖酶在大肠杆菌中的表达及其构建开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1 右旋糖酐简介右旋糖酐，又名葡聚糖，是若干葡萄糖脱水形成的聚合物，分子式为(c6h10o5)n上世纪发现制糖中所产生的粘液真正组分为由葡萄糖基组成的多聚糖，因为它溶于水，且具有强烈的右旋性，故称为右旋糖酐。

它是世界上最早发现的并较早作为血浆代用品的微生物多糖。

其结构式如图1所示，主要由葡萄糖α-(1,6)糖苷键连接而成，同时还杂有α-(1,3)糖苷键和α-(1,4)糖苷键连接形成的分支结构。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究手段（途径）：（1）通过pcr技术，扩增获得编码右旋糖酐蔗糖酶的基因；（2）提取ptrc99a载体质粒，对载体进行双酶切，获得酶切后的载体；（3）将目的基因与载体通过一步克隆相连，转化至dh5α感受态细胞中。

（4）提取转化后感受态中的质粒，再将其导入表达细胞bl21感受态中。

（5）50ml lb摇瓶37℃下培养，当od600达到0.8左右，加入0.1mmol/l的iptg，20℃培养20h。