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基因重组内切葡聚糖酶(EGⅠ)的酶学性质研究及应用开题报告

 2021-08-08 02:39:00  

全文总字数:2745字

1. 研究目的与意义

重组内切葡聚糖酶(EGⅠ)的酶学性质,包括最适反应pH、最适反应温度,及相应的pH稳定性及热稳定性,并以桦木木聚糖为底物进行酶解条件的优化。

重组内切葡聚糖酶(EGⅠ)是通过基因工程的手段得到的重组酶液,由于它的组分单一,应用比较广泛,可作用于结构比较松散的β-1,4键,研究发现重组酶液可以酶解桦木木聚糖,所以本实验对内切葡聚糖酶进行酶学性质的研究及酶解条件的优化,为今后重组内切葡聚糖酶更深层次的应用奠定了基础。

2. 国内外研究现状分析

天然纤维素酶由于产量低,酶活性不高等原因得不到广泛的应用,随着分子生物学与基因工程技术的发展,纤维素酶的生产与表达技术取得了丰硕的研究成果。

如汤新等进行里氏木霉内切葡聚糖酶在毕赤酵母表达系统中的表达,最终的CMC活力达到2.11U/mL;M.R.Rubini等克隆了Penicillium echinulatum的内切葡聚糖酶基因egⅡ,在毕赤酵母中实现了表达,egI酶的最适条件为pH5.0-9.0,60C,同时具有良好的耐热性。

3. 研究的基本内容与计划

(1)用基因重组方法获得重组菌并培养诱导产酶。

(2)采用不同的方法研究内切葡聚糖酶的酶学性质(最适反应ph,最适反应温度等)。

2014.10~2014.11 文献检索,资料准备,开题报告及基因重组菌培养;2014.11~2015.3酶学性质的探究及制备低聚糖的酶解条件优化;2015.3~2015.5 补充实验,撰写论文及论文答辩。

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4. 研究创新点

(1)用基因重组方法获得基因重组菌并探究其酶学性质;(2)用重组内切酶进行低聚糖的制备并进行酶解条件的优化。

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