不同保存条件对毛竹DNA质量的影响开题报告
2021-08-08 10:43:36
1. 研究目的与意义
毛竹(phyllostachys edulis)属禾本科(poaceae)竹亚科(bambusoideae)倭竹族(shibataeeae)刚竹属(phyllostachys),分布自秦岭、汉水流域至长江流域以南地区,是我国栽培悠久、面积最广、经济价值也最重要的竹种之一,有着广泛的开发前景。
大批量样本的采集、保存以及基因组dna的提取是对毛竹进行遗传资源调查的前提基础。
竹类植物材料中的蛋白质、多糖以及酚、脂类等次生代谢物质给dna的提取和纯化造成很大的困难,从而影响分子生物学研究的进一步开展,本研究通过对ctab及其改进方法提取dna的比较,获得获得了毛竹基因组dna的有效提取方法;另外,经硅胶干燥的植物材料也会随外界环境影响而导致dna降解,当不具备足够空间的超低温环境时,如何进行大批量样本的保存?鉴于此,研究常温、4℃、-20℃及-70℃环境下毛竹叶片干样dna质量差异,可获得相对较佳的干样保存条件,为进一步开展毛竹的分子生物学研究打下基础。
2. 国内外研究现状分析
研究植物基因组dna,要求dna有较高的纯度和得率,以便用于pcr扩增、基因文库的构建及其他后续研究。
植物基因组的dna提取一般须经历破碎细胞壁、裂解细胞膜、除去多糖和多酚等次生物质、变性分离蛋白质、沉淀核酸、去除rna和浓缩dna等几个步骤。
植物dna的提取方法基本上是成熟的,但对不同的植物来说,由于各自的生物化学成分和结构不同,在具体操作中存在较大的差别。
3. 研究的基本内容与计划
一、论主要研究内容
(1)利用不同方法提取毛竹干样叶片dna基因组,one drop测定,琼脂糖凝胶电泳检测。并分析总结最佳提取方法
(2)提取不同保存条件下dna,one drop测定,琼脂糖凝胶电泳检测,研究不同保存条件对毛竹dna质量的影响
4. 研究创新点
本文首次探索毛竹叶片干样DNA最佳提取方法,以及研究不同保存条件对DNA质量的影响,为进一步开展毛竹遗传资源收集提供理论基础。
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