全文总字数：6131字

1. 研究目的与意义

研究目的：经过分析比对不同低温条件下愈伤组织的生长形态、净生长量、褐变开始时间、细胞活力等指标，选择出适宜延长南林895杨愈伤组织继代时间的条件。

研究意义：杨树是我国短周期工业用材林首选树种，其特点是生物量大、生长周期短、用途广。现阶段，杨树产业发展尤为突出，它在改善生态环境，发展区域经济，增加农民收入等方面发挥了重要作用。南林-895（Populuseuramericana cv.Nanlin895）是美洲黑杨与欧美杨的杂交种，它具有速生、优质、高产、无性繁殖能力较强等特点。因此，加强杨树愈伤组织种质资源保存的研究不仅有利于保护植物资源的多样性及遗传的多样性，还极大地减少了木本植物种质保存过程中的遗传变异，最大的优点是种质保存不受土地、人力等条件的限制，取材方便、效率高、极大的节省了开支。本研究以南林-895杨为材料，采用愈伤组织保存来研究种质保存，不仅能长期保存南林895杨的优良形状，而且将对林业生产具有重要指导作用。

2. 国内外研究现状分析

随着生物技术的不断发展，愈伤组织的应用越来越广泛。与此同时，对愈伤组织的保存也进行了越来越深入的研究。常温条件下，应用化学或物理的方法，改变培养基的成分和环境条件，延缓培养物生长，达到保存的目的。常用的方法如;提高培养基渗透压、向培养基中添加生长抑制剂或给予适当的光照时间和光强度。对于延长愈伤保存时间而言，前人研究温度对愈伤组织的保存的方法和技术相对比较成熟一些。低温和超低温保存愈伤组织效果较明显，超低温常用于长时间的保存，而低温保存的的材料恢复生长快，但不如超低温保存的时间长。

超低温研究：

近年来，植物材料的超低温保存技术得到迅速的发展和完善。大量研究证实，植物材料经超低温保存后，仍能在适宜的条件下迅速大量繁殖，再生出新的植株，并保持原来的遗传特性。自1986年quatrano首次成功地保存了亚麻细胞, 此后, setbert和weherbee又成功地保存了荷兰香石竹茎尖。近20多年来，超低温保存技术等到了广泛的应用，半荷风，猕猴桃，杏及橡胶等的愈伤组织的超低温保存都取得了研究成果。从而可以看出超低温保存愈伤组织的技术应用已经得到了很广泛的应用。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

前期准备：愈伤组织诱导及继代的筛选 以南林895杨组培苗为实验材料，选择茎段作为外植体，诱导愈伤组织。利用获得的愈伤组织继代2次后进行试验。

试验开始：

4. 研究创新点

首次采用南林895杨无菌苗茎段为外植体诱导愈伤，探讨低温对南林895杨愈伤组织保存的影响。