1. 研究目的与意义

植物酯酶源丰富，取材方便，制备简单，可利用植物酶中的植物酯酶的抑制技术测定果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药。而酶液不易保存，适用范围有限，本文拟探讨影响固定化效果的重要影响因素，如吸附量、吸附pH、温度等，为植物酯酶的广泛应用提供了科学依据。

2. 国内外研究现状分析

固定化酶或细胞是20世纪60年代发展起来的一项新技术，其应用研究涉及工业、医药、食品、化工、能源开发等各个领域。与游离酶相比，固定化酶或细胞具有反应速率快、稳定性好、使用寿命长、可重复利用等优点，因此，固定化酶或细胞技术具有广阔的发展前景。酶的固定化方法主要有吸附法、包埋法、共价键合法和交联法等。而国外报道用金属螯合作用力等方式固定胆碱酯酶，这些固定方式酶活力损失更小，并且稳定性也较好，对于抑制后酯酶活力恢复问题，国内外都进行了一些研究，取得了一定的进展。

许学勤以大孔径强碱性阴离子交换树脂作为固定化载体，采用离子结合法，对植物粗酶液进行固定化。在室温及酶液对载体比例为4ml:1g的条件下，对酶固定化的环境值、缓液浓度及固定化特性进行了研究。得到的固定化酶对10-7mol/l水平下敌敌畏的抑制仍然有明显的响应，这一效果明显优于游离酶的抑制响应。

王继军以戊二醛为交联剂采用共价交联法，把自己制备的植物酯酶固定在聚苯乙烯微孔反应板上，采用目视比色法进行有机磷农药的检测，检测的灵敏度为0.01～0.1mg/kg，采用这种方法，灵敏度有较大提高。

3. 研究的基本内容与计划

1、对凹凸棒土进行不同改性，并以改性后的凹凸棒土为载体固定小麦酯酶。

2、选用凹凸棒土固定小麦酯酶，对固定化条件：温度、pH值、时间和加酶量进行优化。

2、比较游离酯酶和固定化酶的酶学性质：最适温度、最适pH。

3、比较游离酶和固定化酶的热稳定性和pH稳定性。

实验计划安排如下：

4. 研究创新点

通过改变不同温度、时间、pH值和加酶量等条件，使得小麦酯酶的固定化效果得到不断优化。