1. 研究目的与意义

在有效合理地开发和利用生物质资源研究中，利用纤维素酶实现纤维素向可溶性糖的转化与利用具有非常重要的意义。

peg 促进酶催化木质纤维素机制的完善，将会为更加科学地指导酶催化木质纤维素、更加有针对性地提高酶催化效率提供理论方面的指导。

这一机制的完善，将会为以后的工业生产有效降低酶制剂的消耗、节约能源、降低生产成本，具有良好的经济和社会效益。

2. 国内外研究现状分析

见附件

3. 研究的基本内容与计划

研究内容　　　本课题针对聚乙二醇干预糖苷水解酶催化不溶性底物的机制开展研究，重点考察外源添加物peg对酶活力的影响，初步解释聚乙二醇提高酶解效率的机制。

方案如下：　　　(1)实验必须的分析方法(三素的测定、酶活力的测定、葡萄糖浓度、蛋白浓度的测定)；　　　(2)测定聚乙二醇自组装酶的催化活力(fpase 和 cmcase) ，在反应温度和 ph条件下的稳定性，建立酶催化的本征动力学方程；　　　(3)计算酶催化特征常数(表观 km和vmax)、产物抑制常数和酶失活常数(原始状态和表面自组装后)；　　　(4)利用 1h2nmr谱图中酶及peg的特征峰面积确定酶 peg自组装的程度；　　　(5)比较自组装前后纤维素酶红外谱图和差示扫描量热谱图的差异，确定酶和聚乙二醇作用的主力键型；　　　(6)圆二色谱技术分析自组装前后酶二级结构的变化。

进展本论文的预计时间安排如下：　　　2013.3～2013.4文献检索，资料准备，开题报告及探索性实验2013.4～2013.5酶促反应动力学模型的确定，peg的酶解反应的影响及其机制探索2013.5～2013.6补充实验，撰写论文及论文答辩

4. 研究创新点

(1)研究外源添加物peg对酶解效率的影响；(2)从不同层面综合考察peg对底物酶解的影响： ①尝试以酶促动力学模型来分析avicelph101整个酶促糖化过程以及各反应条件下peg对酶促糖化的影响。

②以 avicel ph101 为底物，探索非离子表面活性剂peg对晶体纤维素酶促糖化的影响及机理。

③探索表面活性剂peg对纤维素酶促糖化促进作用的机制，找出表面活性剂对晶体纤维素的酶促糖化具有不同效果的原因。