一株栎旋木柄天牛寄生菌的鉴定开题报告
2021-08-08 03:02:05
1. 研究目的与意义
栎旋木柄天牛属鞘翅目,天牛科,天牛亚科,柄天牛属的一种昆虫,是中国南方地区栎林的重要害虫之一。国家林业局于2003年首次发布其重要的危险性林业有害生物。该天牛在山东、广西、江西、安徽、河南等省均有分布,主要危害板栗、麻栎、栓皮栎、青冈栎等植物,幼虫蛀食树干边材,初龄幼虫由枝的顶端向下蛀食,其蛀道可长达200cm左右,老龄幼虫在化蛹前环绕枝干蛀食,使寄主环蛀处以上部分脱水枯死;寄主植物一旦遭受危害,轻者会引起风折,严重的将造成整株死亡,造成大量的被害植物的死亡。被害植物一旦出现明显的被害状,树木已失去利用价值及有利的防治时机。栎旋木柄天牛由于其生活史隐蔽,世代不整齐等生物学特点,化学防治比较困难并很难大规模应用,而人工物理等防治措施又进展比较缓慢。但是近年来在天牛生物防治领域取得了较大的进展,不少技术已逐渐推广,生物防治技术已经成为天牛防治技术的一个热点。而病原菌防治技术则是一种重要的生物防治技术。
本课题的研究旨在通过对病原菌的形态特征以及各项生理指标的观察和分子生物学鉴定方法来鉴定可以用于生物防治技术的栎旋木柄天牛的寄生病原菌。为生物防治栎旋木柄天牛提供了新的途径。生物防治因为对人畜安全、不污染环境、防治对象不易产生抗性、能参与生态环境的调控的特性,有利于保持生态平衡以及使森林环境保持良性循环。对保持栎类树林有着重要的意义。
2. 国内外研究现状分析
天牛是一类种类多、分布广的昆虫。我国记载有2700多种,估计超过3000种。大部分种类是重要的蛀干害虫,同时天牛也是我国危害最为严重,治理最为困难的一类害虫。栎旋木柄天牛主要分布在山东、广西、江西、河南等地。是国家林业局于2003年首次发布危险性林业有害生物。
为有效防治栎旋木柄天牛,首先要鉴定出栎旋木柄天牛寄生菌。选出具有病斑的栎树枝干,剪取病健交接处的枝条,每根长约0.5cm,经0.1%升汞表面消毒60s,无菌水浸泡冲洗3次。放入含有乳酸的pda平板上,28℃恒温培养2~3d,挑取茎块周围长出的菌丝,在另一平板上扩大培养,初步镜检,剔除常见杂菌,保存。
在 pda试管斜面上28℃培养分离物10 d,用无菌水冲洗试管斜面的菌落,收集分生孢子,稀释至105个/ml 备用。采用创伤接种法测定其对栎树的致病性,把健康新鲜的栎树枝条剪成8cm左右的长度,放入灭菌培养皿中,两端用吸水纸覆盖,滴加无菌水保湿。接种时用无菌大头针轻轻穿刺茎,在无菌条件下用移液器吸取分生孢子液50μl滴加到伤口处,放入 28 ℃培养箱中观察病斑的形成,按照柯赫法则从接种病斑上分离寄生菌与自然病斑上分离的寄生菌进行对照接种致病试验。
3. 研究的基本内容与计划
1、2014.3.1-2014.3.8 从染病死的僵虫上分离寄生菌。
2、2014.3.10-2014.3.20 纯化分离获得的寄生菌,共两次。
3、2014.3.25 病原物形态特征观察。
4. 研究创新点
国内外对于栎旋木柄天牛的生态学研究以及防治手段的研究都处在起步阶段。本课题通过对栎旋木柄天牛的寄生菌的分离以及鉴定,探究未知的栎旋木柄天牛寄生菌,并对其进行形态生理特征,分子水平上的分析。以次为研究关于栎旋木柄天牛虫害的生物学防治方式提供了新的途径。
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