全文总字数：1804字

1. 研究目的与意义

以安琪酵母发酵葡萄糖，通过对乙醇脱氢酶的基因克隆和表达，提高葡萄糖转化为乙醇的生产效率，为降低乙醇燃料生产成本和推广乙醇燃料的使用提供借鉴。

2. 国内外研究现状分析

由于世界石油能源资源紧缺和石油燃料引起的环境污染问题，世界多个大国都极为重视乙醇燃料的开发和推广。美国是第一大燃料乙醇生产大国，以玉米为原料生产。巴西以蔗糖生产燃料乙醇，生产成本为世界最低，已经率先实现了燃料乙醇对汽油的经济竞争力。欧盟以小麦和甜菜为原料，生产成本最高。中国在燃料乙醇研究领域起步较晚，因地制宜选择合适的原料生产，近年来得到了极大的重视，正在逐步推广，增加乙醇燃料的经济竞争力。

3. 研究的基本内容与计划

（1）建立实验必须的分析方法。测定乙醇脱氢酶酶活力；蛋白浓度及sds-page测定；糖、乙醇测定方法（hplc）。

（2）建立乙醇脱氢酶酶活分析测定方法。考察乙醇脱氢酶的最适合反应温度，ph；考察乙醇脱氢酶的最适反应底物和底物浓度。

（3）重组乙醇脱氢酶基因工程菌的构建。

4. 研究创新点

本实验利用的是耐高温的酿酒酵母中的乙醇脱氢酶，能耐40-42℃高温。实验最后，除将酶表达到大肠杆菌做纯酶的后续酶学性质测定以外，还将表达到乳酸乳球菌中，观察导入乙醇脱氢酶后产物的变化，观察能否产乙醇。