凝结芽孢杆菌S44木糖代谢途径基因的克隆开题报告
2021-08-08 02:52:59
全文总字数:653字
1. 研究目的与意义
基因克隆技术是70年代才发展起来的,它的出现和应用开辟了分子遗传学研究的新领域,打开了人类了解、识别、分离和改造基因,创造新物种的大门。
它的成就对于工业、农牧业和医学产生深远影响,并将为解决世界面临的能源、食品和环保三大危机开拓一条新的出路。
由于微生物基因组较小,将会超过其它生物更快地完成基因组的结构与功能分析,获得的信息将会首先被应用于药物、疫苗产品的开发和疾病的防治。
2. 国内外研究现状分析
经济有效地将木糖转化为乳酸,依赖于纤维素水解原料的成本以及有效的木糖发酵菌株。
jeffries等人曾经预测只有当木糖的乳酸发酵率在最初36h之内到达0.42~0.43g乳酸/g木糖,利用木糖生产乳酸才有商业价值。
现在虽然通过菌株的筛选以及基因工程等手段使乳酸产量得到提高,但是纤维素原料的水解以及发酵木糖生产乳酸的工业化仍存在许多挑战性问题。
3. 研究的基本内容与计划
基因提取;PCR,凝胶电泳;菌种保藏;提质粒;双酶切验证;质粒,载体双酶切;双酶切产物的切胶酶切;重组质粒的构建;重组质粒的转化;重组菌的构建;重组菌的诱导表达;SDS-PAGE检测表达产物;酶学性质测定
4. 研究创新点
十几年来,戊糖发酵机理的研究主要集中在代谢木糖的机理上,人们在木糖发酵菌株的选育上做了大量的工作,综合起来,主要有以下四个方面:1.从自然界中继续筛选木糖发酵菌株2.采用定向培育技术,通过对已有菌株的长期驯化筛选,从而得到所需菌株3.采用原生质体融合技术获得具有双亲双重性状的融合菌株4.应用基因工程手段选育菌株。
迄今为止,国际上在这方面的研究已经取得了许多进展,包括具有直接发酵木糖成乙醇的细菌,真菌及酵母菌的选育及改良,木糖发酵工程菌的建立及在酿酒酵母中克隆木糖异构酶的基因等等。
今年来,随着生物技术的发展,基因重组技术在木糖发酵菌种的选育上得到了广泛运用,构建了一批工程细菌。
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