转Bt基因棉花种子的定性PCR检测方法构建开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：转基因棉花已有品种通过审定应用于农业生产，人们关心其目标性状的表现，就抗虫棉种子而言，种子的纯度和全生育期的毒蛋白表达状况决定其抗虫性，因此毒蛋白的定量、定性检测是生产上转基因抗虫棉鉴定和评价的有效手段。

国内外研究概况及前景：1. bt抗虫基因是使用最早、最广泛，也是最有效的基因，目前，在生产上使用的转基因抗虫棉大多是转bt抗虫基因。

随着转基因抗虫棉大量种植，一些昆虫开始对其产生抗性。

2. 研究的基本内容和问题

转bt基因棉花的广泛种植，棉花产量也取得了巨大效益。

但随着转基因品种的大量推广应用，种子市场必然会出现以假冒真或劣质转基因品种的高价销售问题，如何方便快捷的鉴定种子的真假便是重中之重。

转基因抗虫棉的分子检测可分为筛查检测和特异性检测。

3. 研究的方法与方案

本实验主要路线方法为以下几点：棉花种子进行RNA的提取，琼脂糖凝胶电泳检测RNA活性RNA反转录成cDNA ，PCR产物的电泳检测，PCR产物的回收，PCR产物的酶切鉴定，PCR产物的克隆和测序， 结果分析。

本实验的过程简明，RNA的逆转录技术比较成熟具备实行的条件。

4. 研究创新点

本实验针对当前我国种子市场各方面的问题，以转Bt基因棉花种子为试验对象，采用方便直观的方法对种子真实性进行进一步的测定分析，为找到一种更加高效的种子真实性鉴定方法提供了各种帮助。

5. 研究计划与进展

2017年12月15日2018年1月12日确定选题、收集相关资料2018年1月13日 1月31日撰写开题报告与开题2018年3月1日 3月17日收集资料，开展研究，形成写作提纲2018年3月18日 5月25日深入研究，形成论文初稿 2018年5月26日6月30日论文修改、定稿、打印、答辩