腐食酪螨取食和植物激素处理对糙皮侧耳挥发性物质代谢的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：糙皮侧耳又名平菇，肉质鲜美并且有一定的药用价值，是世界上主要栽培食用菌之一。

萜类物质萜类是高等真菌中存在的一类结构丰富、生物活性多样的次级代谢产物。

国内外研究组从侧耳属真菌中报道过的萜类包括有二萜、单萜和倍半萜，这些物质具有抗菌、抗支原体、抗炎、抗肿瘤等生物活性。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：1、明确植物激素MeJA、SA处理糙皮侧耳后对其挥发性代谢物质的影响2、明确腐食酪螨取食糙皮侧耳后对其挥发性代谢物质的影响3、探究前两种处理之间糙皮侧耳产生的挥发性代谢物质的相似性研究内容：1、采用平板培养和液体发酵的方法进行菌丝培养，并选取CK及乙醇助剂处理为两种对照，在培养前（平板培养）、培养7天（液体发酵）加入植物激素MeJA、SA，设置浓度为10μM，25μM，50μM，100μM和200μM，一共培养14天，收集无污染菌丝测定挥发性物质含量2、每个长满菌丝的平板上放入50头成螨，分别取食1、2、3、4天，无污染的菌丝收集后分析萜类含量3、顶空固相微萃取（HS-SPME）和气质联用法(GC-MS/MS)联合分析拟解决的关键问题：解析腐食酪螨取食和植物激素处理对糙皮侧耳挥发性代谢物质的影响，通过顶空固相微萃取（HS-SPME）和气质联用法(GC-MS/MS)联合分析，根据相似物质找到其间的关联

3. 研究的方法与方案

研究方法：用腐食酪螨和植物激素对糙皮侧耳进行处理，并用顶空固相微萃取（hs-spme）和气质联用法(gc-ms/ms)联合分析其对挥发性物质代谢的影响技术路线： 糙皮测耳ccmssc00602菌株（腐食酪螨胁迫、信号分子meja/sa刺激）对糙皮测耳菌丝体萜类代谢的影响gc-ms法分析挥发性物质组成和含量分析代谢水平腐食酪螨和植物激素处理对糙皮测耳挥发性物质代谢的影响实验方案：1、供试材料： 1.1供试螨虫：腐食酪螨于2012年采自江苏省徐州市毛木耳上，腐食酪螨置于人工气候箱（spx-2501，上海博讯实业有限公司）内用2 ml离心管饲养，脱脂棉封口，以毛木耳原种大量饲养获得生育期一致的所需试虫，温湿度设定为250.5℃、85% rh。

1.2供试寄主：供试寄主糙皮侧耳(pleurotus ostreatus)，本试验分析所用的是食用菌寄主菌丝。

菌丝的培养和保存：在实验前，将不同供试食用菌的母种菌种接种于pda培养基（培养皿直径d=70 mm）中，每个品种接种10个平板，封口膜封口后25 ℃下避光培养，待菌丝长满平板后备用，4℃冰箱保存。

4. 研究创新点

特色或创新之处本论文的创新性在于首次在开展害螨诱导对食用菌寄主挥发性物质代谢的影响，同时也开展了茉莉酸甲酯和水杨酸处理后糙皮侧耳代谢物质的影响。

创新性较强。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展2017.9-2017.12腐食酪螨取食后糙皮侧耳的挥发性物质的采集与分析2018.1-2018.3植物激素处理后对糙皮侧耳的挥发性物质的采集与分析2018.3-2018.5数据整合处理及论文攥写，并完成答辩