成龄蚂蟥冬眠临界温度和可耐受极限低温的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

蚂蟥（whitmania pigra whitman）是中药材水蛭的基原动物之一，是众多治疗心脑血管疾病的原料药［１］。

然而由于环境的污染和需求的增加，野生蚂蟥数量急剧减少，蚂蟥药材及药品价格不断攀升。

蚂蟥的人工养殖逐渐受到重视。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标：本实验将以蚂蟥（whitmania pigra whitman）为材料，研究其冬眠过程中的临界温度，为下一步研究蚂蟥冬眠的机理，也为寻找调控蚂蟥休眠的内在因子、开展耐低温蚂蟥选育、制订蚂蟥越冬策略等工作奠定基础。

研究的内容：（1）观察不同温度下蚂蟥的活动特点。

采用静水停食实验法，设置不同的温度梯度，观察并记录蚂蟥的活动特点，判断其是否进入冬眠状态。

3. 研究的方法与方案

研究方法：（1）实验材料：由南京农业大学中药研究所提供，经郭巧生教授鉴定为蚂蟥（whitmania pigra whitman）；水为充分曝气24 h以上的自来水。

（2）实验仪器：mr210a溶氧测量仪（南京特安科贸有限公司）、fyl-ys-108l低温保存箱（北京福意电器有限公司）、电子天平（上海精密仪器厂）、呼吸仪（自制）。

（3）实验设计：将8℃、6℃、4℃、2℃的冬眠蚂蟥取出，分别于4h、6h、8h、10h、12h后观察观察蚂蟥的活动特点，并测定呼吸瓶水的含氧。

4. 研究创新点

近年对于蚂蟥的研究越来越多，发现其除对血液系统作用外，对抗肿瘤、脑保护、改善肾功能、抗纤维化、抗炎等方面也有显著影响。

然而对于蚂蟥的研究大多侧重在药理和生理方面，其人工养殖方面的研究却很少。

本实验以成龄蚂蟥为材料，研究其冬眠的临界温度，为以后研究蚂蟥冬眠的机理，也为寻找调控蚂蟥休眠的内在因子、开展耐低温蚂蟥选育、制订蚂蟥越冬策略等工作奠定基础。

5. 研究计划与进展

2015年5月～2015年6月做好实验前期准备，熟悉所涉及的实验方法，查阅相关文献，准备开题。

2015年6月～2015年7月测定8℃、6℃的冬眠蚂蟥的耗氧率。

2015年7月～2015年8月测定4℃、2℃的冬眠蚂蟥的耗氧率。