舍曲林逆转拮抗CUMS抑郁模型对海马SIK2表达的促进效应开题报告

1. 研究目的与意义

抑郁症可谓21世纪最备受关注的神经精神疾病之一，该病已经给社会与家庭带来日益严重的负面影响与精神负担。尽管临床上迄今已有较多门类的抗抑郁药物，但由于中枢大脑的结构与功能复杂性，抑郁症的生理病理机制依然不明，而我们课题组的最新研究发现海马盐诱导激酶2（sik2）介导参与了慢性应激诱发抑郁症过程，是一有效抗抑郁靶点。 盐诱导激酶（sik）属于腺苷酸激活蛋白激酶ampk家族的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，包括三种亚型：sik1、sik2、sik3。其中sik2是crtc1的磷酸化激酶，可以使crtc1的ser151磷酸化,使胞浆中的crtc磷酸化为pcrtc而留在胞浆中，无法与核内的creb结合，影响其转录因子调控功能。 同时，研究中发现慢性应激大幅增加海马盐诱导激酶2（sik2）的表达水平，此变化引起神经元核内环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（creb）与creb转录共激活因子（crtc1）的结合水平减少，进而使得脑源性神经营养因子（bdnf）表达与神经发生水平均受损，引发一系列症状。这表明海马sik2-crtc1通路参与慢性应激诱发抑郁症的过程。这一过程证明海马sik2是一个十分有效的新型抗抑郁靶点，具有显著临床价值与意义。

舍曲林是选择性5-ht再摄取抑制剂（ssri）“五朵金花”之一，除5-ht系统外，海马sik2有没有可能也是舍曲林的药理靶点呢？

本课题旨在通过抑郁症模型，行为学测试，western blotting 以及免疫荧光手段，研究海马sik2在舍曲林抗抑郁机制中的作用，以期能够找到又一个抑郁症靶标，具有显著临床价值与意义。同时拓展了对舍曲林的研究认识。

2. 研究内容和问题

研究内容：本项目旨在研究海马sik2在舍曲林抗抑郁机制中的作用

1，以c57bl/6小鼠作为具体研究对象，制造慢性温和不可预测应激（cums）抑郁模型并给予舍曲林治疗，随后以western blot技术检测舍曲林与cums对小鼠海马sik2蛋白表达水平的影响。

2，以c57bl/6小鼠作为具体研究对象，制造cums抑郁模型并给予舍曲林治疗，随后以qrt-pcr技术检测舍曲林与cums对小鼠海马sik2的mrna表达水平的影响。

3. 设计方案和技术路线

慢性温和不可测应激模型（cums）模型是被学术界广泛采用并得到充分认可的抑郁模型制造方法，能够在大小鼠身上有效模拟抑郁症引发的行为绝望、快感丧失、社交恐惧等症状。采用这种模型方法，对一批正常c57bl/6小鼠先给予为期6周的cums模型制造，并于最后2周内每日给予腹腔注射30 mg/kg 舍曲林（组别：正常对照组，舍曲林组，cums组，cums 舍曲林组；每组10只），给药结束后进行行为学测试评价模型与舍曲林药效，使用强迫游泳测试（fst），悬尾测试（tst）以及糖水消耗测试来验证模型效果。

测试结束后分批取海马组织进行如下实验：

①提取蛋白，进行western blot，检测各组的海马sik2蛋白水平。

4. 研究的条件和基础

1.本论文前期调研工作开展相对充分，已获得比较完全的文献资料.

2.本课题组一直致力于对抑郁症病理生理机制以及新型抗抑郁药物的研究开发。本研究将主要在南通大学药学院学院药理学实验室进行，该实验室为江苏省炎症与分子药靶重点实验室依托基地。近5年来承担国家省部级课题40多项、市厅级课题30多项。设有心血管药理研究室、神经精神药理研究室、生化研究室、行为学研究室等。本课题所需设备本实验室皆具备。实验所需实验小鼠可由南通大学动物房提供。