1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.脂酶的简介 酯酶(ec3.1.1.x),它是水解外源和内源酯类物质的酶的统称,根据酯键水解类型的不同再进一步分为多种亚型。
包括羧酸酯酶、硫酯酶、硫磷酸酯酶以及磷酸二酯酶等几种。
酯酶主要催化水解的是短链的醋类化合物,同时它作为一种重要的生物催化剂,已经得到了越来越广泛的关注,目前的研究成果已经使其能够应用于工业化生产。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1.本课题的研究目的定向进化的目的在于人为地改变一些天然酶的特性,使其具有明显改复的性质,比如稳定性的增强,酶的立体选择性的提高等,从而获得天然酶所不具备的某些优良特性,甚至还能创造出新的性质,达到扩大酶应用范围的目的。
本课题将对酯酶的定向进化的研究,找出降低成本、提高产量的进化方法。
2.实验中拟采用的研究手段采用高通量筛选法,具体步骤如下: 1.基本的材料与方法的确定1.1主要设备:pcr仪1.2选择高通量筛选法1.3脂酶活力相关参数测定:1.3.1底物特异性测定1.3.2反应条件的测定1.3.3不同反应值测定1.3.4温度和ph的计算 2.实验结果2.1易错pcr条件的确定2.2突变库的构建与初步筛选2.3实验结果 3.脂酶定向进化研究进展
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