1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
水稻是最重要的粮食作物之一,水稻的产量与全球粮食安全息息相关。
因此,水稻产量研究一直备受各界关注。
水稻穗型大小是水稻的产量结构中最重要的因素,因此,研究水稻穗型相关的遗传与qtl分析对于改良水稻产量等具有重大意义。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标:全基因组发掘宝大粒中具有育种利用价值的穗型QTL。
2.研究内容:(1)构建大穗型品种宝大粒与小穗品种矮格拉的F2分离群体和次级分离群体;(2)构建分子图谱,初步定位每穗颖花数、一次枝梗数、二次枝梗数等穗型相关QTL;3. 拟解决的关键问题找出控制穗型的新颖QTL位点。
3. 研究的方法与方案
1.性状调查:在成熟期对单株进行取样,每单株取较大的3个穗,室内测量性状穗长、一次枝梗数、二次枝梗数、每穗颖花数(总粒数),取平均值。
2.dna提取:f2群体每株随机选取一片幼嫩叶片,采用ctab法提取dna。
步骤 操作说明1 将取得的新鲜叶片剪碎至合适大小,将碎叶片放入预先加入配套玻璃珠的2.0ml离心管中(玻璃珠过小时可放两个)2 将离心管放入磨样盒中,利用液氮速冻后戴手套取出(注意低温),机器研磨3min至磨碎,注意离心管是否破损3 将完好且装有叶片粉末的离心管取出,加入600μlctab提取液(2%)后,置于65℃烘箱中进行三十分钟左右的保温,期间每隔十分钟颠倒混匀一次,保证反应进行4 在离心管中加入与已有液体同等体积的混合比为24:1的氯仿:异戊醇混合液,将离心管反复颠倒使液体充分混匀,静置65℃条件下保温5 1.2*104r/min转速下离心八分钟,用移液枪吸取上清液200μl,加入预先准备好的离心管中(容积1.5ml)6 将异丙醇预冷,吸取等体积加入离心管,再次颠倒,充分混匀,静置两小时7 5000r/min转速下进行十分钟离心,保留沉淀,用75%乙醇重复洗涤 2 次倒掉。
4. 研究创新点
大穗型水稻品种宝大粒中尚未发掘出穗型QTL,我们前期初步的QTL检测发现该品种水稻7号染色体存在新颖的大穗型QTL位点。
本研究进步一确认该位点,便于精细定位和克隆。
5. 研究计划与进展
本研究在2017年于南京农业大学江浦试验农场进行田间试验,预计每系20行种植,每行种植8到10株,播种时间定于2017年5月下旬,田间管理和病虫防治严格按常规水稻栽培技术要求进行,使材料正常生长;2017.8-10月起在农场取样叶片,提取DNA,PCR分型,构建图谱;2017.10-12月,取穗调查性状;2018.2-3月,完成定位;2018年4月,撰写论文。
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