沙门菌前噬菌体的诱导纯化及特性分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

沙门菌是一种常见胞内寄生革兰氏阴性短杆菌，常存在于多种动物的肠道中，我国目前已检出292个沙门氏菌的血清型，其中172株在人体中检出，146个在动物体中检出，除此之外在环境及各种动物制品中也有存在[1]。沙门菌是引起食物中毒的重要病原之一，在我国，因沙门氏菌而引起的食物中毒更是居于榜首[2]，另外对于猪及禽类养殖危害尤为严重，可引起猪霍乱、猪伤寒、鸡白痢、鸡副伤寒等疾病[3]，给养猪、养禽业造成巨大经济损失。

在实际生产中，大量抗生素被用于沙门菌的防治，人类因沙门菌引起的食物中毒中，常用喹诺酮类抗生素结合止吐止泻药来治疗沙门菌引起的各种症状，同时给予电解质补充[2]，养猪业也常用甲砜霉素、土霉素、磺胺嘧啶等抗生素用于治疗沙门菌感染[4]。抗生素的滥用也导致了沙门菌耐药性的产生，国内外分离到的致病性沙门菌常具有多重耐药性，如施开创临床分离到的34株治病性沙门氏菌，均对美洛培南、亚胺培南、大观霉素和安普霉素敏感，另对7种抗生素的耐药率为50%至90%[5]。

因细菌产生多重耐药性的现象日趋严重，噬菌体作为自然界中天然存在的细菌“天敌”，再次引起抗菌制剂开发者的关注。

2. 研究的基本内容和问题

2.1 研究目标

（1）诱导并纯化沙门菌基因组中前噬菌体；

（2）测定单株噬菌体裂解谱；

3. 研究的方法与方案

3.1研究方法

本项目拟对实验室临床分离保存的47株沙门氏菌，用丝裂霉素c进行诱导，用双层平板法纯化培养3-5次，分析噬菌体的裂解谱等特性。通过控制不同的变量，探究噬菌体在不同条件下的裂解能力。

3.2技术路线

4. 研究创新点

沙门氏菌前噬菌体的研究远不及其烈性噬菌体的研究透彻，其特性、形态等方面研究尚不透彻，本实验可对几株噬菌体了裂解谱、特性、形态等进行探究，为沙门氏菌溶原性噬菌体相关研究提供一定的参考，为沙门氏菌的防治提供一种新思路。

5. 研究计划与进展

2018.10-11月 查阅相关中英文文献，设计实验并进行预实验

2018.12月-2019.1月 完成噬菌体的诱导及鉴定

2019.2月-3月 噬菌体的纯化及效价测定