小鼠大脑、小脑的组织学研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

神经系统是人和动物体内最为复杂的结构和机能系统,而脑是神经系统的高级中枢【1】。

神经科学是当代生命科学中发展迅速的前沿学科之一，脑亦被列为21世纪最受瞩目的研究领域【2】。

神经科学的任务是研究和揭示神经系统的结构和功能损伤、修复与再生,发生、发育与衰老，遗传与进化等方面的自然规律和相互关系。

2. 研究的基本内容和问题

一.研究目标 本研究通过制作健康小鼠大脑和小脑组织石蜡切片，在光学显微镜和电子显微镜观察其组织及细胞形态，研究并构建完整的大脑及小脑组织形态标准，为病理组织病变鉴别诊断和生物医学研究提供依据。

本实验也探讨如何改善石蜡切片的质量，分析石蜡切片过程中各环节可能出现的问题，并挖掘影响其质量的关键因素，旨在为石蜡切片初学者提供较为规范化的操作方法。

二．研究内容 1.大脑和小脑连续组织石蜡切片的制作，取材、固定、透明包埋、修块、连续切片、染色以及固定。

3. 研究的方法与方案

一．研究方法 制作小鼠脑组织石蜡切片，在光学显微镜和电子显微镜观察组织形态。

二．技术路线取材固定-脱水、透明-包埋-修块-连续切片-染色-光镜、电镜观察三．实验方案1.设计实验内容1）实验动物饲养2）取实验动物小鼠大脑和小脑组织于固定液保存；3）准备各种制片材料、试剂等；4）制作切片5）观察结果，分析总结小鼠大脑和小脑组织的形态结构，做好相关记录。

2.实验分组1）小鼠大脑组织标本，置于10%中性福尔马林固定液固定，用记号笔在瓶子上标记日期，样品名称等，24小时后备用；2）小鼠小脑组织标本，置于10%中性福尔马林固定液固定，用记号笔在瓶子上标记日期，样品名称等，24小时后备用；3.标本制作 1）取材 将固定过的脑组织切成0.5cm3 的组织块，用流水冲洗5-30min; 2）脱水、透明 将切片轮流浸泡于75% 酒精3h；85% 酒精1h ；95% 酒精Ⅰ，1h；95% 酒精Ⅱ，1h；100% 酒精Ⅰ45min；100% 酒精Ⅱ，45min ；二甲苯透明 1min 30s ；全蜡（1min入苯蜡，苯：蜡=1:3），2h；包块（组织周围用热镊子除气泡）；包块结束，关熔蜡箱。

4. 研究创新点

特色或创新之处本研究通过制作小鼠脑组织组织石蜡切片，利用光学、电子显微技术将实验动物的脑组织结构进行显微水平展示，通过观察其染色和形态结构特点，并建立标准的脑组织显微模式，进而对脑组织形态构成有更全面系统的认识，有利于为病理学组织病变诊断提供借鉴依据。

5. 研究计划与进展

一．研究计划时间 内容2016.9-2016.10 查阅文献，搜集相关资料，如石蜡切片的制作方法；学习光学显微镜及电子显微镜的规范操作等。

2016.10-2016.11 制作小鼠大脑和小脑组织石蜡切片，进行光镜和电镜观察组织形态，反思操作方法，发现问题，及时解决，并对操作方法进行改进。

2016.11-2016.12 汇总观察结果，分析切片形态及染色特点，规范操作方法，完成研究项目，提交相关报告，撰写论文。