体外多酶催化合成PAPS的反应调控与优化研究开题报告

 2023-04-10 16:59:06

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

1.研究背景 生物分子的硫酸化在真核细胞中普遍存在,在涉及体内平衡和激素代谢的各种生物过程中发挥着关键作用。

硫酸化是蛋白质、碳水化合物和脂类等物质的一种重要修饰机制,控制着多种生物学过程。

硫酸化的发生依赖于活性硫酸根供体3-硫酸腺苷-5-磷酰硫酸(paps),它由paps合成酶(papss)负责合成。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1. 待研究或解决的问题(1)PAPS合成酶的表达与纯化;(2)PAPS合成酶的酶学性质表征;(3)多酶催化反应体系设计;(4)对酶活、酶活回收率、比活等酶活参数进行测定,并初步探究最适反应温度和pH2.研究手段熟练使用关键数据库查找相关文献解决实验问题,掌握大肠杆菌培养,基因重组,质粒构建及转化,PCR扩增,凝胶电泳,高效液相,多酶催化反应等实验方法

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